技术文献
大鼠CD3分子(CD3)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
2 IU/ml-48 IU/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定大鼠相关液体样本中CD3 分子(CD3)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠CD3 分子(CD3)水平。用纯化的大鼠CD3
分子(CD3)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入CD3 分子(CD3),
再与HRP 标记的CD3 分子(CD3)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底
洗涤后加底物。颜色的深浅和样中的CD3 分子(CD3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下
测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样中大鼠CD3 分子(CD3)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准(96IU/ml) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠CD3分子(CD3)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
操作步骤
1. 标准的稀释:本试剂盒提供原倍标准支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
48 IU/ml 5 号标准 150μl 的原倍标准加入150μl 标准稀释液
24 IU/ml 4 号标准 150μl 的5 号标准加入150μl 标准稀释液
12 IU/ml 3 号标准 150μl 的4 号标准加入150μl 标准稀释液
6 IU/ml 2 号标准 150μl 的3 号标准加入150μl 标准稀释液
3 IU/ml 1 号标准 150μl 的2 号标准加入150μl 标准稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样孔。在酶标包被板上标准准确加样50μl,待测样孔中先加样稀释液40μl,
然后再加待测样10μl(样zui终稀释度为5 倍)。加样将样加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
原创作者:本生(天津)健康科技有限公司
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