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乙酰乙酰辅酶A(Acetoacetyl-CoA)酶联免疫分析试剂盒

点击次数:160  发布时间:2024/3/28 15:06:34

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公司名称:本生(天津)健康科技有限公司 型 号:BS-0029 生产地址:中国大陆 已获点击:160 简单介绍: 乙酰乙酰辅酶A(Acetoacetyl-CoA)酶联免疫分析试剂盒本生生物公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器等。
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  乙酰乙酰辅酶A(Acetoacetyl-CoA)酶联免疫分析试剂盒  BS-0029

  本试剂盒仅供研究使用。

  检测范围:

  96T

  0.3ng/L - 18 ng/L

  使用目的:

  本试剂盒用于测定微生物中乙酰乙酰辅酶 A(Acetoacetyl-CoA)含量。

  实验原理

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中乙酰乙酰辅酶 A(Acetoacetyl-CoA)水平。用纯化 的乙酰乙酰辅酶 A(Acetoacetyl-CoA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中 依 次 加 入 乙 酰 乙 酰 辅 酶 A(Acetoacetyl-CoA) , 再 与 HRP 标 记 的 乙 酰 乙 酰 辅 酶 A(Acetoacetyl-CoA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深 浅和样品中的乙酰乙酰辅酶 A(Acetoacetyl-CoA)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸 光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中乙酰乙酰辅酶 A(Acetoacetyl-CoA)浓度。

  试剂盒组成

  1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶

  3 酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液 6ml×1 瓶

  5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶

  7 终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶

  9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份

  11 封板膜 2 张; 12 密封袋 1 个

  标本要求

  1.标本处理:(1)水样 采集后经 -20℃反复冻融三次,再经玻璃纤维过滤后,备查

  (2)组织

  样品用丁醇:甲醇:水(5:25:70 V:V:V)抽提,或按相 关文献提取进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验, 可将标本放于-20℃保存,备查

  2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

  乙酰乙酰辅酶A(Acetoacetyl-CoA)试剂盒操作步骤

  1. 加样:分别设标准孔、空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、 待测样品孔。在酶标包被板上标准孔中加 50 微升,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl, 然后再加待测样品 10μl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

  2. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。

  3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 60 分钟。

  4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

  5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 后弃去,如此 重复 5 次,拍干。

  6. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

  15 分钟.7. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

  8. 测定:以空白孔调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

  计算

  以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数, 即为样品的实际浓度。

  注意事项

  1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 1 小时后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

  2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

  3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间好 控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

  4. 请每次测定的同时做标准曲线,好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值 大于标准品孔孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计 算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。

  5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物请避光保存。

  7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

  8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

  9.本试剂不同批号组分不得混用。

  检测范围:

  10 ng/L -500ng/L

  规格:

  96 人份/盒 48人份/盒

  保存条件及有效期

  1.试剂盒保存:;2-8℃。

  2.有效期:6 个月

更新时间:2024/6/18 8:34:23


标签:乙酰乙酰辅酶A(Acetoacetyl-CoA)酶联免疫分析试剂盒   
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