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BUNSEN本生:ELISA检测方法的原理及其优缺点
Elisa试剂盒试验原理:
Elisa试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牵9体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。
用于检测抗体的间接法,用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
优点:操作方便,实验可靠
缺点:暂未发现
缺点:
1、只是诊断的辅助手段,特异性和灵敏性有待提高。
2、操作过程有些繁琐,反应血药时间,不能一蹴而就。
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原创作者:本生(天津)健康科技有限公司
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