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本生技术分享:ELISA实验中缓冲溶液等试剂的配置
ELISA实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础,ELISA试剂以及各种溶液如何配置?近刚做了下ELISA实验,天津本生把各种ELISA配置方法汇总如下:
1、ELISA实验包被缓冲液
2、ELISA实验洗涤缓冲液
3、ELISA实验稀释液
4、ELISA实验终止液
5、ELISA底物缓冲液
6、ELISA实验TMB四甲基l苯a、使用液
7、ELISA实验ABTS使用液
8、ELISC
试剂:
1、ELISA实验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):
NaHCO31.59g
NaHCO32.93g
加蒸馏水至1000ml
2、ELISA实验洗涤缓冲液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4 0.2g
Na2HPO4·12H2O2.9g
NaCl 8g
KCl0.2g
Tween-20 0.05%0.5ml
加蒸馏水至1000ml
3、ELISA实验稀释液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1g
加洗涤缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。
4、ELISA实验终止液(2M H2SO4):
蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸98%、21.7ml。
5、ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4g/L) 25.7ml
0.1M 柠檬酸(19.2g/L)24.3ml
加蒸馏水50ml
6、ELISA实验TMB(四甲基l苯a)使用液:
TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml
底物缓冲液(PH5.5)10ml
0.75%H2O2 32μl
7、ELISA实验ABTS使用液:
ABTS0.5mg
底物缓冲液(PH5.5)1ml
3%H2O22μl
8、ELISA实验封闭液:
牛血清白蛋白(BSA) 5g
加洗涤缓冲液至100ml
值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉,不适合保存。
为了ELISA实验的准确性,实验操作中加入的缓冲液和各组分一定要,将洗涤液加入酶标板中的时候防止加入的试剂混入另外一个酶标孔,严防交叉污染。
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原创作者:本生(天津)健康科技有限公司
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