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植物花青素合成酶(ANS)ELISA试剂盒

点击次数:520  发布时间:2024/7/31 10:44:10

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公司名称:本生(天津)健康科技有限公司 型 号:BS-8058 生产地址:中国大陆 已获点击:520 简单介绍: 植物花青素合成酶(ANS)ELISA试剂盒实验原理本生生物公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器等。
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  植物花青素合成酶(ANS)ELISA试剂盒实验原理

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定样品指标水平。样品包括血清血浆尿液脑脊液细胞固体组织等,用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入样品,再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中浓度,或者与CUTOFF值相比较,从而判定标本阴阳性。

  BS-8058  植物花青素合成酶(ANS)ELISA试剂盒  96T/48T

  植物花青素合成酶(ANS)ELISA试剂盒组成

  1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶

  2 酶标试剂 6ml×1瓶

  3 酶标包被板 12孔×8条

  4 样品稀释液 6ml×1瓶

  5 显色剂A液 6ml×1瓶

  6 显色剂B液 6ml×1/瓶

  7 终止液 6ml×1瓶

  8 标准品 0.5ml×1瓶

  9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶

  10 封板膜 2张

  样品收集、处理及保存方法

  1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转 离心10分钟将血清和红细胞迅速 小心地分离。

  2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

  3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

  4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

  5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在 室温下解冻并确保样品均匀地充 分解冻。

  样本要求

  1.样本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

  2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

  植物花青素合成酶(ANS)ELISA试剂盒操作步骤

  1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照随货说明书中图表在小试管中进行稀释。

  2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

  3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

  4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

  5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30后弃去,如此重复5次,拍干。

  6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

  7.温育:操作同3。

  8.洗涤:操作同5。

  9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.

  10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

  11.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

  计算

  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

  

 

  植物花青素合成酶(ANS)ELISA试剂盒注意事项

  1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

  2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

  3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

  4.请每次测定的同时做标准曲线,好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物请避光保存。

  7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

  8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

  9.本试剂不同批号组分不得混用。

  10.保存2-8℃。

  11.有效期:6个月

更新时间:2025/3/10 8:47:59



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