蛋白检测 Western Blot NP40裂解液(带有抑制剂)

详细内容

　　蛋白检测   Western Blot  NP40裂解液(带有抑制剂)
 

　　产品简介:

　　N-40裂解液INP-40Lysi Bufer)是 种比和的细胞组织烈解液，其烈解得到的蛋白样品可以用于常规的Westemn、P和co-IP等。用NP-40裂解液烈解得到的蛋白样品，可以使用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

　　保存条件:

　　裂解液保存于2~8°C，其他保存于-20°C，一年有效

　　操作流程:

　　1、试剂准备

　　取适当量的裂解液，在使用数分钟内将蛋白酶抑制剂复合物或 和磷酸酶抑制剂复合物按照1:50加入裂解液中，或者使用100mM的PMSF，并使PMSF的终浓度为1mM.

　　2、细胞组织的裂解

　　对于贴壁细胞: 去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔加入150-250工裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2后，细胞就会被裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续烈解10分钟:对于县浮细胞: 离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔L板每L细胞加入150-250L裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞 管，然后再裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果用于ChI，初步裂解后需在水浴上继续裂解10分钟。对于组织样品: 用组织剪将组织剪成碎片后，按照每20mg组织加入150-250L裂解液的比例加入裂解液并使用用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。如果用于ChI，初步裂解后需在冰浴上继续烈解10分钟。

　　3、蛋白样品收集

　　充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和ChIP等操作.

　　注意事项:

　　1、为取得佳的使用效果，可以适当分装后-20%C保存使用，避免过多的反复冻融:2、裂解样品的所有步骤都需在冰上或2~ 8C进行:

　　温要提示:为了您的自身安全，使用试剂，请做好防护，如穿实验服，带手套等.

　　蛋白检测   Western Blot  NP40裂解液(带有抑制剂) 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

更新时间：2024/4/18 8:36:31

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