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点击次数:151 发布时间:2023/8/17 15:35:26
神经染色 伊文思蓝染色液系列 本生
规格:100ml
保存条件:4℃避光保存
保质期:6 months
产品名称:伊文思蓝染色液(0.5%)
简介:
伊文思蓝(Evans Blue)又称偶氮蓝,是一种非膜渗透性偶氮染料,与血浆白蛋白高度亲和,高度易燃。分子式C34H24N6Na4O14S4,分子量为960.80,CAS号为314-13-6。当质膜受损时,染料能进入细胞质和细胞核,从而将其染成蓝色,可用来检测细胞活力。伊文思蓝还能用来研究血脑屏障( BBB )渗透性,通过与白蛋白结合从而指示血脑屏障穿透蛋白能力。伊文思蓝与台盼蓝都是细胞活性染料,常用于组织切片染色,测定血脑屏障完整性、染色区分活细胞、测定血容量。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。活细胞因有外排功能而无法被伊文思蓝染色,因此可以通过此方法在显微镜下区分死细胞与活细胞,但是没有办法区分死亡与坏死。
BUNSEN本生代理伊势久伊文思蓝染色液(0.5%)使用很方便,直接加入样本染色即可。主要用于组织切片染色,抗超敏递质实验,该产品仅用作科研实验,不可做他用。
保存条件:
4℃避光保存。
操作步骤(仅供参考):
(一)血脑屏障通透性
1、 取处理后的实验动物(以小鼠为例),静脉注射Evans Blue Stain (0.5%),小鼠眼睛、皮肤出现蓝色。0.5~1 h后处死小鼠,取目的脑组织。
2、 脑组织置于1.5 ml 离心管中,加入1 ml PBS, 迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆,离心。
3、 取上清,加入等量三jys,4℃孵育。该步骤亦可采用如下操作:取上清,按上清:丙 酮=3:7比例加入丙酮,室温孵育24 h。
4、 离心15 min。
5、 取上述溶液,用分光光度计测620 nm处吸光值(OD值)。同时测定已知不同梯度的标准依文思蓝的OD值,绘制标准曲线。根据标准曲线计算出待测待测样品的依文思蓝含量。
(二)活细胞染色
1、 取100ul重悬细胞到常规离心管内,加入100ul Evans Blue Stain轻轻混匀染色(染色时间可适当延长,但不宜超过10 min)。
2、 吸取少量经过染色后的细胞,用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数500个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。细胞存活率计算公式如下: 细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100%
注意事项:
1、 Evans Blue Stain对人体有轻微毒性,请小心防护。
2、 细胞染色时,注意凋亡小体偶尔也有拒染现象。
3、 血脑屏障通透性实验中,Evans Blue Stain注射量应根据不同动物以及动物的重量调整。
4、 好采用低温冷冻离心机进行离心。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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更新时间:2024/4/23 8:40:46
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