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热点新闻:胎牛血清冻存有哪些注意事项
阅读次数:237 发布时间:2023/11/21 10:04:54
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  热点新闻:胎牛血清冻存有哪些注意事项
 

  血清溶解建议-如何减少沉淀:

  ● 将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱12-24小时左右使之浴解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

  ● 切勿将刚刚从-20℃冰箱里拿出来的血清直接放在水浴中,无论室温的水或者37℃的水,因为在水浴中血清迅速熔化,很大的温差(-20℃到37℃,温差为57℃)其容易造成血清产生沉淀。

  ● 直接放65℃水浴中更是其残忍的做法,是对血清的亵玩,对科学规则的粗暴践踏!

  ● 血清应该在-10℃以下保存。若一次无法用完一瓶,应该无菌分装,再冷冻保存。

  胎牛血清冻存的注意事项:

  1. 需要长期保存的血清有必要储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时刻切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因而,血清在冻入低温冰箱,有必要预留一定体积空间,不然易发生污染或玻璃瓶冻裂。

  2. 合规生产企业供给的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤器过滤血清。

  3. 瓶装血清冻结需采用逐渐冻结法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装,在溶解过程中需不断悄悄摇晃均匀(小心勿形成气泡),使温度与成分均一,削减沉积的发作。切勿直接将血清从-20℃进入37℃融化,温差大的情况下血清容易形成蛋白质凝聚而出现沉积和沉淀絮状物。

  4. 热灭活是指56℃,30分钟加热已彻底冻结的血清。加热过程中须规矩摇晃均匀。目的是使血清中的补体成分(complement)灭活,除非有必要,一般不建议做此热处理,因为热处理会形成血清沉积增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:滑润肌细胞收缩、肥大细胞和血小板释放组胺、增强吞噬作用、促进淋巴细胞和巨噬细胞发作化学趋化和活化。相关研究的使用者可以考虑血清增加热灭活处理。

  5. 切勿将血清在37℃放置太久或者反复冻融,不然血清会变得污浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量。

  6. 血清融化后的沉淀主要是血清中的脂蛋白变性及冻结后血清中纤维蛋白形成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可分装至无菌离心管400g离心去除,也可不用处理直接加入培养基内一起培养。完全不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。

  7. 显微镜下小黑点是由于经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多,有些沉淀物在显微镜呈现为黑点,常误认为血清受污染。

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