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ELISA试剂盒酶标板在什么情况下失效,实验数据处理!
ELISA试剂盒的保质期一般都是在一年,假设保存妥当的话,不会出现疑问的。但不要重复冻融。当然假设是正常的DAS-ELISA查看试剂盒等,应当放在4℃支配冰箱保存。建议ELISA试剂盒冻结后一次用完。已开封或许运用后,剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,ELISA查看试剂盒开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免湿润。
但要留意的是,假设将ELISA试剂盒刚从冰箱里面拿出来就当即运用的话,也许会影响,其直接的效果是对一些弱阳性标本的查看出现假阴性。
建议:先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在ELISA查看试剂盒运用与室温平衡。这么做的目的,要是为了在后面的温育反应进程中,能使反应微孔内的温度能较快地到达所恳求的高度,以满足测定恳求。
ELISA试剂盒的板子啥情况下会失效?
1.一般商品化的酶标板恳求密闭4℃保存,长时间显露或未密闭保存,要么失效,要么效果为非可靠数据;假设是自个包的板,也许效期更短,保存条件恳求更高,至于显色剂,正常条件下一天内不会失效的。
2.第三板是不是*按照两板加全部试剂,假设缺失其间某一进程,效果也会无色。
ELISA实验的计算方法:
方法:
1、拟和曲线:
输入*行:浓度值,如
输入第二行:该浓度下的调整后的od值,如00.5861.3971.9973.42
选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型"中选择“xy散点图";在“子图表类型"中选择“折线散点图",按“下一步";选择“系列产生在行",按“下一步";数据标志,可以填写:如数据y轴,OD值;数据x轴,浓度;按下一步,点击完成。可得曲线图。
单击曲线,按右键,选择“添加趋势线",在类型中,选择多项式;在选项中,选择显示公式,选择显示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面说的方法:双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和曲线。
2、ELISA试剂盒计算浓度:
*次实验:
标准曲线为:
y=-4E-05x2+0.026x
R2=0.9745
为例,已知OD值,计算浓度。
由于y=-4E-05x2+0.026x,所以可以得到:
4E-05x2-0.026x+y=0
ax2+bx+y=0
a=4E-05;b=-0.026;
x=(-b-(b*b-4ay)(平方根))/(2*a)
代入a,b,和y值,得
x=(0.026-(0.026*0.026-0.00016*y)(平方根))/(2*0.00004)
在excel里可以用以下公式表示:
x=(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*y)/2))/(2*0.00004)
通用公式为:
x=(-b-EXP(LN(b*b-4ay)/2))/(2*a)
您可以应用excel的公式拷贝功能,计算所有浓度。
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