ELISA试剂盒的操作方法、注意事项和优势

　　ELISA Kit通称为ELISA试剂盒、酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种灵敏度高，特异性强，重复性好的实验方法，且因其试剂稳定，易保存，耗时短，操作简便，结果判断客观等优点，已被广泛应用于免疫学检验的各域中，得到全科研工作者的认可。

　　ELISA是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技术。酶联免疫吸附试验的标准程序，通常是把蛋白、抗体、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗体(capture Ab)固定在固相载体上，再加入一检测抗体(primarydetection Ab)，形成一个抗原抗体的复合物。如果该抗体已经用酶(enzyme)标记了，即可用来直接测定抗原的量，若无，则可利用另一个酶标记的二抗体来测定抗原的量。测定抗原量的方法是加入该酶的底质(substrate)，作用后产生出现的颜色深浅和样本中的抗原量呈正比的关系，依此原理计算出样本中的抗原总量或浓度。

　　BUNSEN本生 ELISA Kit覆盖人、小鼠、大鼠、兔、猪等种属，指标齐全。每个试剂盒均经过严格的质控检验，结果稳定，重复性和线性范围好，特异性和灵敏度高，涉及免疫学、神经性、微生物学、细胞生物学、表观遗传学等多个科学域。

　　BUNSEN本生产品优势：

　　1.采用高效、灵敏、特异的抗体。

　　2.易保存、耗时短、操作简便、性价比高。

　　3.稳定的重复性和可靠性，线性范围好。

　　4.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体。

　　5.适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种标本类型。

　　Elisa试剂盒操作方法：

　　1.标准品的稀释，请按照说明书进行操作。

　　2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

　　3.加样：不规范的移液操作可能带来误差。

　　1)空白孔，空白对照孔不加样品，生物素标记的抗体，链霉亲和素-HRP，只加显色剂A&B和终止液，其余各步操作相同;

　　2)标准品孔：加入标准品50ul，链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素抗体，故不加);

　　3)待测样品孔：加入样本40ul，然后各加入抗NE抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul，盖上封板膜，轻轻震荡混匀，37℃温育60分钟。

　　4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

　　5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30后弃去，如此重复5次，拍干。

　　6.显色：每孔先加入显色剂A50ul，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

　　7.终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

　　8.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后10分钟以内进行。

　　9.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。

　　10.仅供参考，以试剂盒内实际说明书为准。

　　Elisa试剂盒本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。