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标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败。我公司技术人员在处理售后的问题中,有不少科研朋友咨询曲线的问题。下面本生生物小编将影响elisa试剂盒曲线问题的原因做了总结:
一 OD值不正常的可能原因是:
1、试剂盒未回温,试剂盒回温到25℃;
2、温度控制不好,控制正确温度;
3、孵育时间不准确,控制孵育时间;
4、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加,洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干;
5、阳光直射,对着风直接吹,避风避;
6、酶标仪的波长错误,酶标仪的波长450nm;
7、抗体的稀释错误,正确的稀释抗体;
8、水质问题,用娃哈哈矿泉水代替。
二 白板的可能原因是:
1、洗涤液配制错误,正确的配制洗涤液;
2、少加液体(错加液体),正确的步骤加液体。
三 无梯度可能原因是:
1、标准品也污染,换标准品点板;
2、OD值不正常,控制温度时间在做一次;
3、人为点板,不要点板。
四 线性不好可能原因是:OD值不正常,控制温度时间在做一次。
elisa试剂盒是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法,由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素,以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测,既可以做定性试验也可以做定量分析等优点,已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。
注:以上资料仅供参考!
原创作者:本生(天津)健康科技有限公司
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